Estudo Clínico e Molecular na Distrofia Muscular de Duchenne / Clinical and Molecular Study on Duchenne Muscular Dystrophy

Fundamentos: A forma de Duchenne é a mais comum e grave das distrofias musculares. De herança recessivaligada ao cromossoma X, acomete meninos e afeta os músculos estriados e o miocárdio. Origina-se de mutaçõesno gene da distrofina, o maior gene humano com 79 éxons. Objetivos: Verificar as alterações cardíacas iniciais em pacientes pediátricos com distrofia muscular de Duchenne (DMD) e realizar o estudo molecular das alterações no gene da distrofina. Métodos: Estudo prospectivo incluindo pacientes pediátricos portadores de DMD, com avaliação clínica, medição do nível sérico de creatinofosfoquinase, eletrocardiograma, ecoDopplercardiograma e eletrocardiografia dinâmica e genotipagem do DNA, com amplificação dos 18 éxons mais acometidos.Resultados: Foram estudados 11 meninos de 6-14 anos de idade. Não havia alterações importantes ao exameclínico cardiológico. Observou-se aumento da creatinofosfoquinase em todos os pacientes. O eletrocardiogramamostrou alterações precoces, com ondas R altas em V1 (n=7), bloqueio de ramo direito (n=2), ondas delta e PR curto (n=1) e distúrbio da repolarização ventricular (n=1). Em 4 pacientes, o ecocardiograma evidenciou sinaisde disfunção sistólica. O eletrocardiograma dinâmico (Holter) mostrou alteração em 4 pacientes: com muitas extrassístoles (n=3) e com síndrome de Wolff-Parkinson-White (n=1). Todas as crianças recebiam corticoterapia. Não houve correlação significativa entre a deleção do éxon 52 e arritmias (p=0,43). O estudo molecular evidenciou deleção do éxon 52 nos 4 pacientes com cardiomiopatia dilatada, sendo que em 2 havia deleção concomitante nos éxons 1 e 50, respectivamente. Nos outros 7 pacientes havia deleção nos éxons 48, 51, 52 e 57.Conclusões: O eletrocardiograma mostrou as primeiras alterações nos pacientes pediátricos com DMD. Nos casos com cardiomiopatia dilatada e arritmia, detectou-se deleção do éxon 52.

Background: Duchenne Dystrophy is the most common and severe form of muscular dystrophy. It has an X chromosome-linked recessiveinheritance and affects boys’ striated muscles and myocardium. It is caused by mutations in the dystrophin gene, the largest human gene, composed of 79 exons. Objectives: To check the early cardiac changes in pediatric patients with Duchenne muscular dystrophy (DMD) and carry out the molecular study of changes in the dystrophin gene.Methods: Prospective study involving pediatric patients with DMD, with clinical assessment, measurement of serum levels of creatine phosphokinase, electrocardiogram, Doppler echocardiography and dynamic electrocardiography and DNA genotyping, with amplificationof the 18 most affected exons. Results: A group of 11 boys aged 6-14 years was studied. Clinical cardiological examination did not reveal any major changes. An increase in creatinine phosphokinase was detected in all patients. Electrocardiogram showed early changes, with high R waves in V1 (n=7) right bundle branch block (n=2), delta waves and short PR interval (n=1), and signs of disturbance of ventricular repolarization (n=1). Echocardiogramshowed signs of systolic dysfunction. Dynamic electrocardiogram (Holter) showed changes in 4 patients: with many extrasystoles (n=3) andWolff-Parkinson-White syndrome (n=1). All children received corticosteroid therapy. There was no significant correlation between exon52 deletion and arrhythmias (p=0.43). The molecular study revealed an exon 52 deletion in 4 patients with dilated cardiomyopathy, of which2 had concomitant deletion of exons 1 and 50, respectively. Other 7 patients had deletions of exons 48, 51, 52 and 57. Conclusions: Electrocardiogram showed the first changes in pediatric patients with DMD. In cases with dilated cardiomyopathy and arrhythmia, the deletion of exon 52 was detected.

Diagnóstico molecular diferencial das principais doenças neuromusculares degenerativas em crianças da população do Rio de Janeiro / Molecular differential diagnosis of main neuromuscular degenerative disease in children population of Rio de Janeiro

Dentre o grande número de doenças de origem genética conhecidas que afetam os seres humanos, existem algumas que são degenerativas e que acometem tecidos importantes. Neste trabalho foram estudadas as doenças neuromusculares mais frequentes na população mundial: Distrofia Muscular de Duchenne (DMD) e Becker (DMB) e Atrofia Muscular Espinhal (AME). A Distrofia Muscular de Duchenne, que afeta aproximadamente 1/3.500 homens, é a mais comum e a mais grave das distrofias hereditárias e sua herança é recessiva ligada ao cromossomo X. O gene da distrofina tem aproximadamente 2,3 milhões de pares de bases distribuídos em 79 éxons, tornando-se o maior gene conhecido em seres humanos. A Distrofia Muscular de Becker, que difere clinicamente da DMD pela evolução lenta, trata-se de uma afecção mais benigna, de início tardio. A clonagem destes genes mostrou que as duas doenças são de fato causadas por mutações diferentes no mesmo locus. Com uma prevalência de 1/10.000 nascimentos, as Atrofias Musculares Espinhais, são doenças hereditárias do segundo neurônio motor, que causam fraqueza muscular progressiva: a AME tipo I (Werdnig-Hoffmann), a forma mais grave, a Intermediária ou tipo II e a Juvenil ou tipo III. Elas diferem com relação à idade de início, à gravidade e aos músculos afetados. Dois genes foram associados, o gene de sobrevivência do neurônio motor (SMN) e o da proteína inibitória de apoptose neuronal (NAIP). Este trabalho teve por objetivo principal o estudo do diagnóstico molecular diferencial dessas doenças tendo em vista a grande dificuldade em estabelecer o diagnóstico clínico correto, já que essas desordens apresentam um quadro clínico bastante semelhante entre si. A metodologia utilizada foi baseada em técnicas de Biologia Molecular, sobretudo o PCR-multiplex e Nexted-PCR. Dos 48 pacientes com suspeita clínica de DMD e DMB, 13 não apresentaram confirmação molecular para essa doença e dos 36 pacientes com suspeita clínica de AME, 18 foram confirmados pelo diagnóstico molecular. Com isso foi formulado um algoritmo com o intuito de direcionar o diagnóstico molecular tornando-o mais eficiente e econômico, já que a caracterização molecular de cada doença específica, no menor tempo possível, propicia a escolha do tratamento mais adequado, acarretando uma melhora na qualidade de vida do paciente.

Dificuldades diagnósticas na atrofia muscular espinhal / Spinal muscular atrophy diagnostic difficulties

OBJETIVO: Descrever o perfil clínico e laboratorial de pacientes com atrofia muscular espinhal (AME) com deleção no gene da proteína sobrevivência do neurônio motor (SMN). MÉTODO: Estudo descritivo de uma série de casos confirmados pela presença da deleção no gene SMN. Determinação da freqüência da positividade dos critérios clínicos e laboratoriais revisados. RESULTADOS: Foram incluídos no estudo 22 casos. Em todos havia paresia simétrica, sendo a localização difusa predominante nos casos de início antes de 6 meses (75 por cento), enquanto nos demais havia predominância de localização proximal e/ou em membros inferiores (67 por cento). Fasciculações e atrofia foram freqüentes (82 por cento). Os exames complementares tiveram resultados variáveis, sendo a positividade da eletroneuromiografia (ENMG) de 57 por cento e da biopsia muscular de 58 por cento. CONCLUSÃO: A presença de deleção no gene SMN pode ajudar a confirmar o diagnóstico de casos indefinidos .